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論如何處理Waters色譜耗材的污染問題
   論如何處理Waters色譜耗材的污染問題
  Waters色譜耗材的柱效是Waters色譜耗材在色譜分離過程中主要由熱力學因素所決定的分離效能。通常用理論塔板數(shù)表示。柱效是衡量Waters色譜耗材性能的一項主要指標,柱效越高,分離能力越強。
  柱效測試方法可以根據(jù)每根Waters色譜耗材附帶的測試報告提供的方法條件進行試驗。通常實際測試結(jié)果比Waters色譜耗材所附的測試報告結(jié)果偏低是正常的。因為儀器公司測試塔板數(shù)的HPLC系統(tǒng)是專門設計的,整個系統(tǒng)擴散體積非常小。
  如果新柱測試結(jié)果與報告中有很大不同,很大可能是由于色譜系統(tǒng)配置以及死體積等因素的影響。需要考慮不同柱外體積的影響:
  柱外體積是指“額外”或“外部”(相對于Waters色譜耗材)體積,是系統(tǒng)的一部分,尤其是各LC部件、Waters色譜耗材之間的連接管線體積、進樣體積和流通池體積。
  對于各部件的連接管線,為了減少體積可以使用更小內(nèi)徑的管線。
  下面的例子就顯示了柱外體積的影響。當使用較小的柱子時,10ml的柱外體積可以得到良好的分離結(jié)果,當加上一段管線形成50mL的柱外體積,色譜峰變寬、分離度降低。在向系統(tǒng)中添加體積不明的管線時,這種情況經(jīng)常發(fā)生。添加一段太長的管線,或內(nèi)徑較大的短管時,會使柱效Waters色譜耗材的分離度變差。
  不同內(nèi)徑的管線對色譜峰展寬的影響。管線內(nèi)徑越大,樣品譜帶在管線內(nèi)發(fā)生的擴散也就越da,色譜峰展寬也就越嚴重。當然,內(nèi)徑越大,同等長度的管線帶進去的柱外體積也越大。
  原則上,系統(tǒng)的大柱外體積(管線體積、進樣體積和檢測器體積)不應超過柱體積的10%。
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